无血清培养基(Serum-Free Media,简称SFM)是一种在细胞培养中不需添加血清的培养基,然而在某些特定应用中,仍可能需要添加生长因子或细胞因子。这类培养基的主要组成成分包括粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能够减少血清带来的不利影响,从而提供更加稳定的细胞培养环境。经过天然培养基和合成培养基的发展,无血清培养基逐渐成为当前细胞培养领域的重要趋势。采用无血清培养基能够简化多种细胞产品的纯化与鉴定程序,降低病毒污染的风险。
无血清培养基的分类
无血清培养基作为继天然和合成培养基之后的第三类培养基,无动物血清或其他生物提取液的添加,仍能良好维持细胞在体外的生长与繁殖。由于其成分较为明确,制备过程相对简单,无血清培养基在现代生物技术领域得到了广泛应用,同时也是研究细胞生长、增值、分化及基因表达调控的重要工具。
目前,无血清培养基的研究主要集中在两个方向:一是完全不含任何动物来源的添加组分;二是无不明确的添加组分。根据使用情况,当前常见的无血清培养基可分为以下四类:
- 一般意义上的无血清培养基:采用各类替代血清作用的生物材料配制,如牛血清白蛋白(BSA)、转铁蛋白、胰岛素等大分子物质,以及去除蛋白质后的混合脂类和水解蛋白。
- 无动物来源培养基:为基于安全性考虑而开发的培养基,添加组分不含动物来源,所需蛋白来自重组蛋白或蛋白水解物。
- 无动物蛋白培养基:此类培养基完全不使用动物来源蛋白,但包含植物蛋白水解片段或合成多肽等。
- 化学组分限定培养基:这是较为理想且安全的培养基,确保每批次都有一致性,且添加的动物来源蛋白水解物皆有明确成分。
无血清培养基的优缺点
无血清培养基的优点包括:
- 避免血清批次间的质量波动,从而提高细胞培养和实验结果的重复性。
- 减小血清对细胞的毒性及血清源性污染的风险。
- 消除血清成分对实验的影响。
- 有利于细胞在体外的分化。
- 提高细胞产品的表达水平,方便后续纯化。
- 组分稳定,适合大规模生产。
- 不含有丝分裂原抑制剂,从而促进细胞增殖。
相应地,无血清培养基也存在一些缺点:
- 细胞在无血清环境下更易受到机械和化学因素的影响,保存及应用不如传统培养基便捷。
- 成本较高。
- 针对性强,某一类型的无血清培养基仅适用于特定细胞的培养。
- 不同分化阶段的细胞需不同配方,生长因子和细胞因子的选择尤为关键。此外,去除血清的同时也去掉了其保护与解毒作用,因此对试剂、水质和器材的洁净度要求更高。
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